高一生物微生物的实验室培养介绍

1850字
主题:微生物培养、实验规范、色素提取、生物技术、生命科学

高一生物微生物的实验室培养知识点

该知识点包括培养基、无菌技术、实验操作(制备牛肉膏蛋白胨固体培养基、纯化大肠杆菌)等几个要点知识。

培养基:培养基的类型

(1)加入培养基中的凝固剂(如琼脂),一般不能被微生物利用,只起到凝固作用。

(2)选择培养基一般只生长具有特定目的的微生物,鉴别培养基可以存在其他微生物,而且能鉴别特定的微生物。

2. 无菌技术:消毒与灭菌

用酒精消毒时,70%的酒精杀菌效果。若浓度过高,菌体表面蛋白质凝成一层保护层,则乙醇分子不能渗入其中;若浓度过低,杀菌能力减弱。

获得纯净培养物的关键是防止杂菌污染,无菌技术可从如下四个方面展开:

(1)对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒。

(2)将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。

(3)为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在酒精灯火焰附近进行。

(4)实验操作时,应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。

3. 实验操作(制备牛肉膏蛋白胨固体培养基、纯化大肠杆菌):

制备牛肉膏蛋白胨固体培养基步骤是:

(1)计算:根据培养基配方比例,计算配制100ml的培养基,各种成分用量。

(2)称量:准确称取各种成分。

(3)溶化:将称好的牛肉膏加少量水溶化后,加入称量好的蛋白胨、氯化钠、琼脂加热溶解,并补加蒸馏水定容至100ml。

(4)灭菌:将配置好培养基转移到锥瓶中,塞上棉花塞,包上牛皮纸,再放入高压蒸气灭菌锅,在压力为100kpa、温度为121℃,灭菌15~30min。将培养基用旧报纸包裹,放入干热灭菌箱内,在160~170 ℃下灭菌2h。

(5)倒平板:待培养基冷却到50 ℃左右时,在酒精灯附近倒平板。

微生物的实验室培养考点分析

考题多以非选择题的形式出现,考查微生物的培养条件、代谢特点,实验室微生物培养规范和主要步骤。预计未来的高考命题将通过生产生活中有关微生物计数、微生物分离与培养等实际问题考查培养基消毒灭菌等基础知识。

微生物的实验室培养知识点误区

对于有关微生物的培养和应用的题目,应注意从以下几个方面把握:

(1)培养基营养构成:包括碳源、氮源、无机盐和水四部分,有的还需加入生长因子等;其中各成分由哪种有机物提供,应根据其化学元素组成来推断。

(2)实验过程中,必须设置对照实验,要明确设置对照实验的方法。

(3)了解无菌操作技术,以及常用的方法和适用范围。

2.培养基的制作是否合格 :如果未接种的培养基在恒温箱中保温1~2 d后无菌落生长,说明培养基的制备是成功的,否则需要重新制备。

3.接种操作是否符合无菌要求:如果培养基上生长的菌落的颜色、形状、大小基本一致,并符合大肠杆菌菌落的特点,则说明接种操作是符合要求的;如果培养基上出现了其他菌落,则说明接种过程中,无菌操作还未达到要求,需要分析原因,再次练习。

4.是否进行了及时细致的观察与记录:培养12 h与24 h后的大肠杆菌菌落的大小会有明显不同。

典型例题

请回答下列关于微生物的相关问题

(1)微生物接种的方法很多,最常用的是平板划线法和______________,平板划线前要对接种环进行灼烧,原因是为了________。

(2)用培养基培养微生物时,培养基中应有_________、________、________和_________等营养,同时还必须满足微生物生长对_______________、________、________的要求。

(3)用碳源培养基分离微生物的主要操作步骤为①原料称量、溶解②________③分装、包扎④灭菌⑤倒平板⑥________⑦培养。

答案:(1)稀释涂布平板法 灭菌 (2)碳源 氮源 水 无机盐 特殊营养物质 ph 氧气 (3)调节ph 接种

解析:(1)微生物最常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法,平板划线前要对接种环进行灼烧,原因是为了灭菌。 (2)培养微生物时,培养基中应有碳源、氮源、水、无机盐等营养,同时还必须满足微生物生长对特殊营养物质、ph、氧气的要求。 (3)用碳源培养基分离微生物的主要操作步骤为①原料称量、溶解②调节ph③分装、包扎④灭菌⑤倒平板⑥接种⑦培养。

高一生物胡萝卜素的提取知识点

该知识点包括基础知识、实验操作及操作提示等2个要点知识。

基础知识:从胡萝卜中提取出的橘黄色物质,包括多种结构类似物,统称为胡萝卜素。胡萝卜素的化学分子式中包含多个碳碳双键,根据双键的数目可将胡萝卜素划分为α、β、γ 三类。β -胡萝卜素是其中最主要的成分。一分子的β-胡萝卜素在人或动物小肠、肝脏等器官内被氧化成两分子的维生素a,因此,胡萝卜素的作用有以下几点:①治疗夜盲症、幼儿生长发育不良、干皮症等疾病;②常用于食品色素;③使癌变细胞恢复成正常细胞。胡萝卜素化学性质比较稳定,不溶于水,微溶于乙醇,易溶于石油醚等有机溶剂。

工业生产上提取胡萝卜素的方法有三种:一是从植物中提取:胡萝卜中含量;二是从大面积种植的岩藻(褐藻)中获得;三是利用微生物的发酵生产。

精选读者点评

这个知识点整理得挺清爽!牛肉膏蛋白胨培养基的五步流程写得清清楚楚,连50℃倒平板这种细节都没漏,说明你上课听得很认真。只是“灭菌”那段把高压蒸气和干热两种方法混在一句里了,容易让人以为要同时做两遍,其实选一种就行,建议用横线轻轻划掉重复那半句。

高二生物选修一期中测参考

3050字
主题:微生物发酵、食品制作、实验操作、检测技术

一、选择题(每题2分,共60分)

1.腐乳制作过程中影响其风味和品质的因素有哪些?( )

①盐的用量 ② 酒的种类和用量 ③发酵温度 ④ 发酵时间 ⑤辛香料的用量

a.①②③④⑤ b. ①②③ c. ①②⑤ d.③④

2.下列关于果酒制作过程中的叙述,正确的是( )

a.应先去除葡萄的枝梗,再进行冲洗,这样洗的彻底

b.使发酵装置的温度维持在20 ℃左右

c.在发酵过程中,需从充气口不断通入空气

d.由于酵母菌的繁殖能力很强,不需对所用的装置进行消毒处理

3.下列关于果醋的制作,错误的是( )

a.果醋的制作需用醋酸菌,醋酸菌是一种好氧菌,所以在制作过程中需通氧气

b.醋酸菌是一种嗜温菌,温度要求较高,一般在50 ℃左右

c.醋酸菌能将果酒变成果醋

d.当氧气、糖源充足时,醋酸菌可将葡萄中的糖分解成醋酸

4.利用酵母菌发酵生产啤酒,培养基的最适温度应调至,利用醋酸菌在发酵过程中生产醋酸,培养基的最适温度应调至( )

a.18~25 ℃,30~35 ℃ b.20~35 ℃,35~45 ℃

c.10~15 ℃,15~20 ℃ d.10~15 ℃,30~35 ℃

5.豆腐上长出了毛霉之后,下一步要加盐腌制,其中不属于加盐作用的是( )

a.调味 b.可使豆腐析出水分,使豆腐块变硬

c.促进毛霉的继续生长 d.抑制微生物的生长,避免豆腐变质

6.变酸的酒表面长的一层膜和泡菜坛内长的一层白膜分别是由哪种菌的繁殖造成的( )

a.醋酸菌、酵母菌 b.酵母菌、毛霉 c.醋酸菌、乳酸菌 d.酵母菌、醋酸菌

7.在检测泡菜中亚硝酸盐含量过程中提取剂的主要成分是( )

a.对氨基苯磺酸 b. n-1-萘基乙二胺盐酸盐 c.氯化镉、氯化钡 d .亚硝酸钠

8.以下四种微生物都参与的豆腐的发酵,从代谢类型上考虑哪一项与其它三项有明显区别( )

a.青霉 b.酵母 c.曲霉 d.毛霉

9.某人利用乳酸菌制作泡菜因操作不当泡菜腐烂。下列原因中正确的是( )

①罐口密闭缺氧,抑制了乳酸菌的生长繁殖 ②罐口封闭不严,氧气抑制了乳酸菌的生长繁殖 ③罐口封闭不严,氧气抑制了其他腐生菌的生长和繁殖 ④罐口封闭不严促进了需氧腐生菌的生长和繁殖

a.①③ b.②④ c.②③ d.①④

10.在果酒、果醋及泡菜制作过程中,所用原料的有机物总(质)量及有机物种类的变化( )

a.减少、增加 b.减少、减少 c.增加、增加 d.增加、减少

11.在制作泡菜时,蒜瓣、生姜及其他香辛料放在 ( )

a.坛底 b.坛中间 c.坛表面 d.与泡菜混合均匀,分布在整个坛内

12.测定泡菜样品中亚硝酸盐的含量时,氢氧化铝乳液的作用是( )

a.与亚硝酸盐发生颜色反应 b.提取泡菜样品中的亚硝酸盐

c.吸附泡菜汁中的杂质,使泡菜汁透明澄清d.用于制备标准显色液

13.制作泡菜并检测亚硝酸盐含量的操作中,制备样品处理液不需要的溶液是 ( )

a.蒸馏水 b.氢氧化钠 c.亚硝酸钠 d.氢氧化铝

14.在制果酒、果醋、泡菜、腐乳时,发酵过程中对氧气的需求分别是 ( )

a.无氧、有氧、无氧、有氧 b.有氧、无氧、无氧、有氧

c.无氧、有氧、有氧、无氧 d.兼氧、无氧、有氧、无氧

15.下列哪项操作会引起发酵液受污染,使发酵失败 ( )

a.榨汁机用温水进行清洗,并晾干

b.发酵瓶先用温水清洗,再用75%的酒精擦拭后晾干使用

c.葡萄先去除枝梗,再冲洗多次

d.每次排气时,只需拧松瓶盖,不能将盖完全揭开

16.下列关于发酵产物检验的说法,错误的是( )

a、果汁发酵是否产生酒精可以用重铬酸钾来检验

b、检验醋酸产生的简单易行的方法是品尝

c、泡菜制作产生的亚硝酸盐可以用对氨基苯磺酸和n-1-萘基乙二胺盐酸盐检验

d、发酵产生乳酸的量可以用比色法测量

17.下列有关平板划线接种法的操作错误的是 ( )

a.将接种环放在火焰上灼烧

b.将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环液

c.蘸取菌液和划线要在火焰旁进行

d.划线时要将最后一区的划线与第一区的划线相连

18.细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理,这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌( )

a.接种针、手、培养基 b.高压锅、手、接种针

c.培养基、手、接种针 d.接种针、手、高压锅

19.获得纯净培养物的关键是( )

a.将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌

b.接种纯种细菌 c.适宜环境条件下培养

d.防止外来杂菌的入侵

20.有关倒平板的操作错误的是( )

a.将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上

b.使打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰

c.将培养皿打开,培养皿盖倒放在桌子上

d.等待平板冷却凝固后需要倒过来放置

21.有关稀释涂布平板法,叙述错误的是( )

a.先将菌液进行一系列的梯度稀释

b.然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面

c.适宜条件下培养

d.结果都可在培养基表面形成单个的菌落

22.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是( )

a.计算、称量、倒平板、溶化、灭菌 b.计算、称量、溶化、倒平板、灭菌

c.计算、称量、溶化、灭菌、倒平板 d.计算、称量、灭菌、溶化、倒平板

23.下列叙述错误的是( )

a.培养乳酸菌时需要在培养基中添加维生素

b.培养霉菌时需将培养基的ph调至碱性

c.培养细菌时需将ph调至中性或微碱性

d.培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件

24.关于牛肉膏蛋白胨培养基的配制需要在火焰旁操作的是( )

a.称量 b.灭菌 c.溶化 d.倒平板

25.以下操作用到接种环的是( )

a.平板划线操作 b.系列稀释操作 c.涂布平板操作 d.倒平板操作

26.能排除培养基是否有杂菌污染的方法是( )

a.将未接种的培养基放在实验桌上培养 b.将未接种的培养基放在窗台上培养

c.将未接种的培养基放在恒温箱中培养d.将已接种的培养基放在恒温箱中培养

液体培养基

27.关于灭菌和消毒的不正确的理解是

a.消毒和灭菌实质上是相同的

b.灭菌是指杀死环境中的一切微生物的细胞、芽孢和孢子

c.接种环用烧灼的方法灭菌

d.常用灭菌方法有加热法、过滤法、红外线法、化学药品法

28.鉴别纤维素分解菌的培养基中碳源为( )

a、cmc-na b、木聚糖 c、纤维素 d、裂解酶

29.刚果红染色时,加入刚果红应在( )

(1)制备培养基时(2) 梯度稀释时 (3)倒平板时

(4)涂布时 (5) 长出菌落时

a、(1)(3) b、(2)(5) c、(3)(5) d、(4)(5)

30.用来判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置的对照是( )

a、未接种的选择培养基 b、未接种的牛肉高蛋白胨培养基

c、接种了的牛肉高蛋白胨培养基 d、接种了的选择培养基

二、非选择题(共40分)

31、如图简单表示了葡萄酒的酿制过程, 请据图分析:(16分)

(1)葡萄酒的酿制原理是先通气进 行 ,以增加酵母菌的数量,然后再 获得葡萄酒。

(2)随着发酵程度的加深,液体密度会逐渐变低(可用密度计测量),原因是 ________________________________。

(3)酒精发酵时,______℃左右是酵母菌最适温度;醋酸菌最适生长温度范围是_____ ℃。

(4)果汁发酵后,是否有酒精生成,可以用___________________来检验,现象是_______

(5)如果用葡萄酒来制葡萄醋,请写出反应式:_____________________________________。

32、如下图是泡菜的制作及测定亚硝酸盐含量的实验流程示意图,请据图回答:(8分)

(1)制备泡菜的盐水中清水与盐的质量比约为___________,盐水需煮沸并冷却后才可使用,原因是___________________________________________________________。

(2)测定亚硝酸盐含量的方法是___________________。

33、(16分)为了检测饮用水中是否会有某种细菌,配制如下培养基进行培养:

(1)该培养基所含有的碳源有___________,其功能是_____________。

(2)该培养基所含有的氮源有___________,其功能是_____________。

蛋白胨 10 g

乳糖 5 g

蔗糖 5 g

k2hpo4 2 g

伊红y 0.4 g

美蓝 0.065 g

蒸馏水 1000 ml

将ph调到7.2

(3)该培养基除含碳源、氮源外,还有微生物需要的营养物质

是____________________。

(4)该细菌在同化作用上的代谢类型是___________型。

(5)该培养基可用来鉴别哪种细菌______________。

a.霉菌 b.酵母菌 c.大肠杆菌 d.乳酸菌

(6)按物理性质划分,该培养基属于 培养基。

精选读者点评

这豆腐乳的“咸香”真饱满,连我这个不吃辣的都想夹一筷子!但第三段说“毛霉像小伞”,伞哪儿来的柄?下次画个简笔画试试?

微生物的营养

400字
主题:生物营养、选择培养、代谢特性、高考复习、学科整合、科学素养

一、微生物需要的营养物质及功能

㈠特殊微生物的特殊碳源

自养微生物:无机碳源

异养微生物:有机碳源

假单孢杆菌:石油烃

甲烷氧化菌:甲烷和甲醇

㈡特殊生物的特殊碳源

硝化细菌:nh3,还作为能源物质。

固氮微生物:n2

反硝化细菌:no3—

㈢生长因子

生物素是黄色短杆菌和谷氨酸棒状菌的生长因子,是一种维生素。

二、选择培养基

根据微生物的结构或代谢特点,在培养基中加入或减去某种物质,从而达淘汰选择的目的。

1、无氮源培养基:选择培养自生固氮微生物,如:圆褐固氮菌。

2、无碳源培养基:选择培养自养微生物,如:硝化细菌。

3、含高浓度食盐培养基:选择培养金黄色葡萄球菌。

4、含抗生素培养基:淘汰细菌,选择培养真菌。

5、用甲醇作碳源:选择培养甲烷氧化菌。

6、用某种石油烃作碳源:选择培养假单孢杆菌。

7、供氧培养:淘汰厌氧微生物。

8、隔氧培养:淘汰好氧微生物。

9、加入氨基嘌吟的动物细胞培养基:选择杂交瘤细胞。

精选读者点评

这篇导语整理得挺清爽,知识点归类清晰,像把散落的珠子串成了链。尤其“特殊碳源”那块,例子选得准,石油烃、甲烷这些词一摆出来,就让人想起实验室里那些小家伙。话说回来“硝化细菌:nh3,还作为能源物质”这句,大小写和标点有点随意,nh₃写成下标更规范哦。